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實驗動物微生物學質量控制是實驗動物標準化的主要內容之一,按微生物學控制程度可將實驗動物分為不同等級:普通級動物、清潔級動物、無特定病原體動物、無菌動物和悉生動物。
1.普通級動物(conventionalanimal,CV動物) 不攜帶規定的人獸共患病病原體和動物烈性傳染病病原體及人獸共患寄生蟲。普通級動物多用于探索性實驗。由于使用普通級動物存在一定的風險,必須有充分的認識和防護措施。我國國家實驗動物標準中,大鼠、小鼠已取消普通級,即凡使用大鼠、小鼠開展實驗必須使用清潔級以上的動物。
2.清潔級動物(clean animal,Cl動物) 除普通級動物應排除的病原體外,不攜帶對動物危害大和對科學研究于擾大的病原體和寄生蟲。清潔級動物較普通級動物健康,又較無特定病原體動物易達到質量標準,目前用于大多數教學實驗中。
3.無特定病原體動物(specific pathogen free animal,SPF動物) 除清潔級動物應排除的病原體外,不攜帶特定的病原體和寄生蟲。
在一般條件下,有許多病原體是呈隱性感染的,微生物與宿主間保持相對平衡,動物不表現疾病癥狀。一旦條件變化或動物在承受實驗處理的影響下,這種平衡遭到破壞,隱性感染被激動物出現疾病癥狀,將嚴重影響實驗的結果。例如,銅綠假單胞菌對動物通常不致病,又鼠和小鼠的繁殖也沒有影響,但用感染本菌的動物進行放射性照射試驗時,卻能誘發動物致死的敗血癥。再如,消化道寄生蟲一般情況下對宿主無嚴重影響,但在放射性試驗中,可因寄生所致的消化道損傷部位發生彌散性出血感染而致使動物死亡。各種疫苗等生物制品生產所采用動物也應為無特定病原體動物。無特定病原體動物是目前國際標準級別的實驗動物。
4.無菌動物(germ free animal,GF 動物) 無可檢出的一切生命體。無菌動物來源于剖宮產或無菌卵的孵化,飼育于隔離環境。另外,用大量抗生素也可以使普通動物暫時無菌,但這種動物不是無菌動物。因為這種無菌狀態往往是一時性的,某些殘留的細菌在適當的條件下又會在體內增殖,即使把體內細菌全部殺死,它們給動物造成的影響也是無法消除的。例如,特異性體的存在、網狀內皮系統的活化、某些組織或器官的病理變化等。因此,無菌動物必須是生來是無菌的動物。
5.悉生動物(gnotobiotic animal,GN 動物) 也稱已知菌動物或已知菌叢動物(animal witl known bacterial flora),是指在無菌動物體內植人已知微生物的動物。悉生動物必須飼養于隔離境。根據植入無菌動物體內菌落數目的不同,悉生動物可分為單菌(monoxenie)、雙菌(dixenic)三菌(trixenie)和多菌(polyxenie)動物。
悉生動物來源于無菌動物,其體內外有已知種類的幾種微生物定居,形成動物與微生物的共生復合機體。悉生動物腸道內存在能合成某種維生素和氨基酸的細菌,不會像無菌動物一樣出現維生素缺乏癥(即使飼料經高壓滅菌不能供給足量的維生素)悉生動物抵抗力明顯增強,易于飼養管理,在有些實驗中可作為無菌動物的代用動物。中國藥檢所的五聯菌悉生動物是將大腸埃希菌、表皮葡萄球菌、白色葡萄球菌、糞鏈球菌和乳酸桿菌5種細菌接種干無菌小鼠,可代替無菌小鼠進行藥物檢定。在免疫學實驗中,無菌動物不發生遲發型變態反應,而感染一種大腸埃希菌的悉生動物就可以發生遲發型變態反應。由于悉生動物可排除動物體內帶有各種不明確的微生物對實驗結果的干擾,因而可作為研究微生物與宿主、微生物與微生物之間相互作用的動物模型。悉生動物還可應用于人類和動物的骨髓移植、人類和動物腫瘤及其治療、病毒學和免疫學、營養代謝和生理學、外科患者感染控制等方面的研究中。
資料來源:《實驗動物屏障設施建設概論》P8-9